Traducción hecha en la Universidad de Alcalá de Henares, España

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Problemas sobre tecnología del DNA recombinado

Tutoría para el problema 6: aplicaciones

Los fragmentos de DNA generados con la endonucleasa de restricción, separados por electroforesis en gel y transferidos a una membrana se ensayan con una sonda (fragmento de DNA radiactivo). Este procedimiento se llama:

Tutoría

La técnica de Southern

Transferencia de los fragmentos de DNA a una membrana de nitrocelulosa
Los fragmentos de DNA se transfieren a una membrana de nitrocelulosa, a la que se unen.
Los fragmentos de DNA se desnaturalizan y se separan mediante electroforesis en gel

Los fragmentos se transfieren a la hoja de nitrocelulosa y se fijan con calor. 

La membrana se somete a una sonda radiactiva de RNA o DNA que se une a los fragmentos complementarios de DNA

Se usa la autorradiografia para detectar los fragmentos radiactivos

Fijación de los fragmentos de DNA
Los fragmentos desnaturalizados de DNA se fijan por calentamiento.

Se añade una sonda radiactiva, que puede hibridar con una secuencia génica del DNA.

La hoja se lava y se pone en contacto con una película sensible a rayos X para conseguir la autorradiografía.

Problema 6 | Respuesta | Problema 7

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El Proyecto Biológico
University of Arizona
Department of Biochemistry and Molecular Biophysics
November 1996
Traducido: junio 2005
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